RCA(Rolling Circle Amplification,滚环扩增)是利用phi29 DNA聚合酶的超长合成能力,在一定条件下(如随机引物、dNTP、Mg离子存在时)能够以线状的超长基因组DNA或环化后的短DNA为模板进行全基因组扩增的技术。本产品是基于RCA技术,针对环状DNA为模板专门开发的RCA试剂盒。
本产品具有下列特点:
- 即开即用,十分简单方便,用户不需要辛苦摸索条件。
- 直接使用纯化的环状单链DNA或环状双链DNA为模板。如果样本为线状DNA,需要预先对其进行环化(本公司有单链DNA环化和双链DNA环化试剂盒)。
- RCA属于恒温扩增,操作简单,但如果要实时监测,需要荧光定量PCR仪器。如果没有,也可以电泳检测或PCR检测扩增效果。
- 含荧光染料,可以实时监测RCA反应过程,不需要跑电泳检测,节约宝贵样品(因为进行RCA扩增的样品都非常珍贵)。
- 实时检测使得反应可以在平台期后就可以结束,避免phi29 DNA聚合酶具有的强3-5外切酶活性降解已经合成的DNA。
- phi29 DNA聚合酶具有的强3-5外切酶活性,故扩增具有高保真性。
- 可以将模板DNA在几个小时到十几小时内扩增万倍左右。
- 本产品足够50次10 mL体系的荧光染料实时RCA反应。
- 得到的DNA可以直接用于测序、酶切或PCR等后续实验。
本产品只能用于科研。