本产品是专门用于检测大肠杆菌基因的探针法qPCR Master Mix。目前大多数Taq DNA聚合酶都是从大肠杆菌中表达并提取,因此不可避免地污染有痕量的大肠杆菌基因组DNA。当含有这些Taq DNA聚合酶的PCR MasterMix用于扩增大肠杆菌基因组DNA时,在空白样本或模板浓度很低的样本中,大肠杆菌专一的引物和探针将识别Taq DNA聚合酶带来的痕量的大肠杆菌基因组DNA,产生假阳性。为了克服此棘手问题,本公司开发了本产品,它具有下列特点:
1.用特殊工艺除去了Taq DNA聚合酶中痕量大肠杆菌DNA污染,在扩增大肠杆菌样本时不会出现假阳性。
2.以2×Mix提供,用户只需准备模板、引物、探针和ROX染料(取决于qPCR仪器)即可以进行探针法实时定量PCR实验,非常方便快捷,降低了操作误差。
3.各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。灵敏度最高时可以达到50拷贝/反应(跟模板质量,引物设计等相关)。
4.既可用于TaqMan探针qPCR,也可以是分子信标(molecular beacon)探针qPCR。
5.灵敏度和专一性比染料法荧光定量PCR更高。
6.可用于大肠杆菌基因组DNA定性实验,也可以用于定量检测。用于定量时线性范围至少为5个数量级。
7.本产品反复冻融20次对扩增效果没有任何影响。
8.本产品足够100次20 μL体系的探针法qPCR反应。
9.本产品只能用于科研。