克必隆双酶梭菌产品图片
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克必隆双酶梭菌

英文名:Bingene Clostridium bifermentans
产品编号:2-C34514
保存温度:-80℃
运输温度:Cold
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2-C34514 1支 1 Week

产品内容

本细菌为G+杆菌,精氨酸双水解酶阴性,尿素酶阴性,不发酵葡萄糖、海藻糖、阿拉伯糖、棉子糖、木糖。专性厌氧,最适pH5.5~8.0。本菌种主要用作研究、质量控制。本菌种的生物危害程度为四类,无致病性。本菌种可用0787 强化梭菌培养基 Reinforced Clostridium Medium(RCM)培养。该培养基配方为牛肉浸粉 10.0 g;蛋白胨 5.0 g;酵母浸粉 3.0 g;葡萄糖 5.0 g;可溶性淀粉 1.0 g;NaCl 5.0 g;NaAc 3.0 g;L-半胱氨酸盐酸盐 0. 5 g;琼脂 15.0 g;蒸馏水 1000.0 mL;pH 6.8。以上成分121℃,灭菌15 min。液体培养基不添加琼脂。推荐使用成品培养基。37 ℃厌氧培养。研究、质量控制。来源历史:←中国检验检疫科学研究院(23904)←北京陆桥技术有限责任公司。
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常见问题

Q1: 克必隆双酶梭菌的活性单位是如何定义的?
A1: 克必隆双酶梭菌的一个酶活性单位(U)指在推荐缓冲液与温度(通常 37℃)下,1 小时内完全消化 1 μg 底物 DNA 中特定识别位点所需的酶量。可据此结合待消化底物的预估位点数量估算实验用量。

Q2: 克必隆双酶梭菌的最佳反应条件是什么?需要使用特定缓冲液吗?
A2: 克必隆双酶梭菌在厂家提供的专用缓冲液中具有最佳活性,标准单酶切反应条件为 37℃ 温育 1 小时。请严格遵循说明书建议的缓冲体系与温度时间,避免可能的星号活性。该酶与多数常见分子试剂兼容。

Q3: 酶切反应完成后是否需要热失活?
A3: 克必隆双酶梭菌通常可通过 65℃ 加热 20 分钟实现热失活,便于后续连接、转化等下游实验。具体条件以说明书为准;若下游对酶残留敏感,也可采用纯化柱回收 DNA 片段。

Q4: 怎么防止克必隆双酶梭菌出现星号活性?
A4: 星号活性指酶在非最优条件(甘油过高、离子强度不适、pH 偏差或酶过量)下切割非典型序列的现象。请控制反应体系甘油浓度不超过 5%、使用推荐缓冲液、避免过量加酶、在准确温度下反应。

Q5: 克必隆双酶梭菌平时怎么存放?
A5: 克必隆双酶梭菌应于 -20℃ 冷冻保存与运输,酶液通常含 50% 甘油缓冲液以防冻结。日常请冰上操作、用后立即放回 -20℃,以维持其长期稳定性与活性。