人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5′端一般都是羟基基团而不是磷酸基团(除非额外付费要求在人工合成时加上磷酸基团),而任何DNA连接酶都不能将一个DNA分子5′端的羟基基团和另一个DNA分子3′端的羟基基团进行连接,因此通过人工合成的DNA片段和天然DNA之间的连接效率一般都比天然DNA彼此的连接效率低(天然DNA 4个端口均可连接,人工合成的DNA跟天然DNA有2个端口可以连接,人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接),尤其是在平末端连接时。本公司开发的DNA磷酸化产品能将DNA分子5′端的羟基基团磷酸化。它具有下列特点:
1. 可以快速把DNA 5′端的羟基基团变成磷酸基团,使人工合成的DNA(包括PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理,也可以对双链DNA片段同时磷酸化处理。
3. 处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等,不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。
5. 本试剂盒只能用于科研。