天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒产品图片
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天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒

英文名:Skygen Inclusion Body Protein Solubilization and Refolding Kit
产品编号:220704
保存温度:常温
运输温度:常温
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220704 100 T In Stock

产品内容

    包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。一般含有50%以上的重组蛋白,其余为核糖体成份、质粒DNA、脂多糖等,大小为0.5-1 m,难溶于水,只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等。包涵体可以避免蛋白酶对表达蛋白的降解,其形成降低了胞内表达蛋白的浓度,故有利于表达量的提高。通过E.coli宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体,其中的重组蛋白质只完成部分折叠,还没形成最后的正确空间结构,所以没有生物活性,要得到有活性的重组蛋白,还需要后续的溶解和复性(重折叠)处理。目前最常用的溶解包涵体的方法是用尿素,Sarkosyl,盐酸胍等强变性剂,其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性,使后续的蛋白质复性处理效率降低。本公司基于包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠的事实,开发了此款温和溶解-复性试剂盒,它跟常规方法比较如下:

    它具有下列特点:
1.    一站式,提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。
2.    采用温和法溶解包涵体,释放出其中没有彻底变性的蛋白质。
3.    提供10种不同的溶解液,用户需要进行小量筛选,从中筛选出最适合自己蛋白材料的一种。用户可以另购选中的任何一种进行大规模操作。
4.    所用复性液基于稀释复性,经过精心优化,有利于大部分蛋白的复性。
5.    本试剂盒足够100次实验,每次实验可处理0.5-1 μg包涵体蛋白。
6.    本产品只可用于科研。
 

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常见问题

Q1: 天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒的主要应用场景是什么?能否用于临床诊断?
A1: 天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒专用于分子生物学试剂相关的检测研究,适用于检疫、监测、科研等非临床领域。产品说明书中明确标注“本产品只能用于科研”,因此不能用于临床诊断或作为医疗决策依据。

Q2: 天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒收到后怎么存放?
A2: 为确保试剂活性,天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒需低温运输、-20℃保存。收到货后请立即置于 -20℃ 冰箱,有效期通常为 24 个月。引物探针干粉使用前短暂离心、加超纯水配成混合液,未用完部分同样 -20℃保存。

Q3: 试剂盒的对照安全吗?
A3: 为保障安全、避免病原扩散,天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒不提供活病原或具传染性的核酸作为阳性对照,通常提供无传染性的对照片段,用于建立标准曲线、验证实验有效性及区分假阴性。如需活样请另行订购。

Q4: 做天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒实验必须设哪些对照?
A4: 请严格按说明书设置标准曲线样品(定量必需)、阴性对照(以水为模板监测污染)以及样品制备阴/阳性对照,以监控核酸提取与扩增全过程的有效性,确保每次检测结果可靠。

Q5: 天净沙包涵体蛋白溶解及复性试剂盒的结果怎么判读?
A5: 判读需结合扩增曲线与 Ct 值:检测样品 Ct 值达到阈值且曲线呈典型 S 型为阳性;处于可疑区间须重复实验确认;无有效扩增曲线为阴性。具体阈值与复测规则以说明书为准。