单细胞是非常重要的实验材料,但是由于单细胞中的RNA很少,平均只有约10 pg总RNA,0.1 pg mRNA。但拷贝算,一个小鼠胚胎干细胞只有2万多个mRNA分子,一个小鼠成纤维细胞只有50万个mRNA分子。因此常常需要将其逆转录成cDNA后,对cDNA进行扩增,方便后续使用。扩增的方法主要有PCR和体外转录法。本产品是基于T7 体外转录法开发的cDNA扩增试剂盒,它具有下列特点:
1. 一站式,即开即用,用户不用单独购买原料并进行优化。
2. 直接用1-500个真核细胞为起始材料,最后得到cDNA单链。本产品不适用于mRNA没有polyA尾巴的细胞,但可以定做本产品的改良型。
3. 基于T7 IVT线性扩增而非PCR扩增,避免了PCR扩增的偏向性。
4. 单链和双链cDNA合成一管完成,减少了多步操作。
5. 可以进行1次或多次扩增,每次扩增可以将拷贝数提升上万倍。
6. 基于磁珠法合成,可以反复使用至少5次,极大提高了效率。
7. 所得cDNA单链可以用于后续实验。如果加入自备的标记核苷酸,还可以进行单细胞cDNA标记,用于后续芯片杂交。
8. 提供可以spike in的阳性对照,方便检测各步效果。
9. 本产品足够进行200次10 mL体系单细胞逆转录反应和10 μL体系的cDNA扩增。本产品不含单细胞制备试剂盒。
10. 本产品只能用于科研。