天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL产品图片
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天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL

英文名:Skygen Exo- Klenow Fragment Exo- 5 U/μL
别名:无双外切Klenow 片段 (exo–) ,5 U/μL(编号241114)
产品编号:221021
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
货号 规格 货期 目录价
221021 100 U 1-3 Days

产品内容

Klenow 片段(exo -)系 DNA 聚合酶 I 的大片段。该片段展现出 5'→3' 聚合酶活性,然而却缺失了 DNA 聚合酶 I 所具备的 3'→5' 以及 5'→3' 核酸外切酶活性。其中,酶的 3'→5' 核酸外切酶活性乃是经由 3'→5' - 核酸外切酶活性位点的突变而得以消除。

产品优势:
- 不存在 3'→5' 核酸外切酶活性,可有效避免对特定反应的干扰。
- 能够掺入经修饰的核苷酸,例如 Cy3、Cy5、荧光素、罗丹明、氨基烯丙基、生物素标记的核苷酸等,从而拓展了其在多种标记

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常见问题

Q1: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL的活性单位是如何定义的?
A1: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL的一个酶活性单位(U)指在推荐缓冲液与温度(通常 37℃)下,1 小时内完全消化 1 μg 底物 DNA 中特定识别位点所需的酶量。可据此结合待消化底物的预估位点数量估算实验用量。

Q2: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL的最佳反应条件是什么?需要使用特定缓冲液吗?
A2: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL在厂家提供的专用缓冲液中具有最佳活性,标准单酶切反应条件为 37℃ 温育 1 小时。请严格遵循说明书建议的缓冲体系与温度时间,避免可能的星号活性。该酶与多数常见分子试剂兼容。

Q3: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL切完怎么终止反应?
A3: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL通常可通过 65℃ 加热 20 分钟实现热失活,便于后续连接、转化等下游实验。具体条件以说明书为准;若下游对酶残留敏感,也可采用纯化柱回收 DNA 片段。

Q4: 什么是“星号活性”?如何避免?
A4: 星号活性指酶在非最优条件(甘油过高、离子强度不适、pH 偏差或酶过量)下切割非典型序列的现象。请控制反应体系甘油浓度不超过 5%、使用推荐缓冲液、避免过量加酶、在准确温度下反应。

Q5: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL平时怎么存放?
A5: 天净沙无双外切活性的Klenow片段 5 U/μL应于 -20℃ 冷冻保存与运输,酶液通常含 50% 甘油缓冲液以防冻结。日常请冰上操作、用后立即放回 -20℃,以维持其长期稳定性与活性。