天净沙染料法实时RCA试剂盒产品图片
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天净沙染料法实时RCA试剂盒

英文名:Skygen SYBR Realtime RCA Kit
别名:滚环扩增、Rolling Circle Amplification
产品编号:221080
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
货号 规格 货期 目录价
221080 50 T 现货

产品内容

RCA(Rolling Circle Amplification,滚环扩增)是利用phi29 DNA聚合酶的超长合成能力,在一定条件下(如随机引物、dNTP、Mg离子存在时)能够以线状的超长基因组DNA或环化后的短DNA为模板进行全基因组扩增的技术。本产品是基于RCA技术,针对环状DNA为模板专门开发的RCA试剂盒。其示意图如下:

本产品具有下列特点:

1.     即开即用,十分简单方便,用户不需要辛苦摸索条件。

2.     直接使用纯化的环状单链DNA或环状双链DNA为模板。如果样本为线状DNA,需要预先对其进行环化(本公司有单链DNA环化和双链DNA环化试剂盒)。

3.     RCA属于恒温扩增,操作简单,但如果要实时监测,需要荧光定量PCR仪器。如果没有,也可以电泳检测或PCR检测扩增效果。

4.     含荧光染料,可以实时监测RCA反应过程,不需要跑电泳检测,节约宝贵样品(因为进行RCA扩增的样品都非常珍贵)。

5.     实时检测使得反应可以在平台期后就可以结束,避免phi29 DNA聚合酶具有的强3-5外切酶活性降解已经合成的DNA。

6.     phi29 DNA聚合酶具有的强3-5外切酶活性,故扩增具有高保真性。

7.     可以将模板DNA在几个小时到十几小时内扩增万倍左右。

8.     本产品足够50次10 mL体系的荧光染料实时RCA反应。

9.     得到的DNA可以直接用于测序、酶切或PCR等后续实验。

10.     本产品只能用于科研。

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常见问题

Q1: 天净沙染料法实时RCA试剂盒适合用在哪些实验里?
A1: 天净沙染料法实时RCA试剂盒专用于分子生物学试剂相关的检测研究,适用于检疫、监测、科研等非临床领域。产品说明书中明确标注“本产品只能用于科研”,因此不能用于临床诊断或作为医疗决策依据。

Q2: 天净沙染料法实时RCA试剂盒的运输和储存条件有什么特别要求?
A2: 为确保试剂活性,天净沙染料法实时RCA试剂盒需低温运输、-20℃保存。收到货后请立即置于 -20℃ 冰箱,有效期通常为 24 个月。引物探针干粉使用前短暂离心、加超纯水配成混合液,未用完部分同样 -20℃保存。

Q3: 试剂盒的对照安全吗?
A3: 为保障安全、避免病原扩散,天净沙染料法实时RCA试剂盒不提供活病原或具传染性的核酸作为阳性对照,通常提供无传染性的对照片段,用于建立标准曲线、验证实验有效性及区分假阴性。如需活样请另行订购。

Q4: 做天净沙染料法实时RCA试剂盒实验必须设哪些对照?
A4: 请严格按说明书设置标准曲线样品(定量必需)、阴性对照(以水为模板监测污染)以及样品制备阴/阳性对照,以监控核酸提取与扩增全过程的有效性,确保每次检测结果可靠。

Q5: 天净沙染料法实时RCA试剂盒的结果怎么判读?
A5: 判读需结合扩增曲线与 Ct 值:检测样品 Ct 值达到阈值且曲线呈典型 S 型为阳性;处于可疑区间须重复实验确认;无有效扩增曲线为阴性。具体阈值与复测规则以说明书为准。