市场上的基于碱变性法的质粒提取试剂盒都是为提取大肠杆菌质粒DNA的提取而开发的,本试剂盒是以碱变性法为基础、专门为农杆菌质粒DNA提取而开发的。其过程是首先菌体经离心悬浮后,被SDS和碱裂解,并且碱使基因组DNA和质粒DNA变性,随后用酸中和,质粒DNA可以快速复性,而基因组DNA不能快速复性,故可以通过离心去除。本产品具有下列特点:
1. 专门为农杆菌质粒提取优化,不适用于非农杆菌。
2. 适用于常见的穿梭质粒和双元质粒,不适用于pTi或pRi等大型质粒,提取这些质粒DNA需另购本公司专门的相关产品。
3. 快速、步骤少,整个操作在40分钟左右完成。
4. 溶液B中有蓝色染料,便于目测非常关键的碱变性和中和反应两步的溶液混匀状况,保证实验效果。
5. 产量高,每毫升过夜培养的菌液可以提取到2-5 μg/mL(取决于质粒是高拷贝、中拷贝还是低拷贝)。
6. 本产品足够50次微量提取,一次可以处理4-5 mL过夜培养的菌液。
7. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒A260/A280在1.8-2.0之间,可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
8. 本产品只能用于科研。