天净沙cDNA第二链合成试剂盒产品图片
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天净沙cDNA第二链合成试剂盒

英文名:Skygen Second Strand cDNA Synthesis Kit
产品编号:230367
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
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230367 10 T 现货

产品内容

    cDNA第二链合成试剂盒的起始材料是已经完成第一链cDNA合成的RNA-DNA杂交链。其原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链,其示意图如下:
 
    本产品具有下列特点:
1.    即开即用,含有合成cDNA第二链的所有试剂,包括RNase H、E.coli DNA聚合酶1和DNA连接酶。
2.    一管式操作,不需要每次进行纯化,不丢失宝贵的样品。
3.    所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
4.    本试剂盒足够10次80 μL体系的cDNA第二链合成反应。

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常见问题

Q1: 天净沙cDNA第二链合成试剂盒的主要应用场景是什么?能否用于临床诊断?
A1: 天净沙cDNA第二链合成试剂盒专用于分子生物学试剂相关的检测研究,适用于检疫、监测、科研等非临床领域。产品说明书中明确标注“本产品只能用于科研”,因此不能用于临床诊断或作为医疗决策依据。

Q2: 天净沙cDNA第二链合成试剂盒的运输和储存条件有什么特别要求?
A2: 为确保试剂活性,天净沙cDNA第二链合成试剂盒需低温运输、-20℃保存。收到货后请立即置于 -20℃ 冰箱,有效期通常为 24 个月。引物探针干粉使用前短暂离心、加超纯水配成混合液,未用完部分同样 -20℃保存。

Q3: 天净沙cDNA第二链合成试剂盒中的阳性对照是什么?是否具有传染性?
A3: 为保障安全、避免病原扩散,天净沙cDNA第二链合成试剂盒不提供活病原或具传染性的核酸作为阳性对照,通常提供无传染性的对照片段,用于建立标准曲线、验证实验有效性及区分假阴性。如需活样请另行订购。

Q4: 实验操作中如何设置对照才能确保结果有效?
A4: 请严格按说明书设置标准曲线样品(定量必需)、阴性对照(以水为模板监测污染)以及样品制备阴/阳性对照,以监控核酸提取与扩增全过程的有效性,确保每次检测结果可靠。

Q5: 如何根据 Ct 值判断天净沙cDNA第二链合成试剂盒的检测结果?
A5: 判读需结合扩增曲线与 Ct 值:检测样品 Ct 值达到阈值且曲线呈典型 S 型为阳性;处于可疑区间须重复实验确认;无有效扩增曲线为阴性。具体阈值与复测规则以说明书为准。