天净沙染料法实时易错PCR试剂盒产品图片
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天净沙染料法实时易错PCR试剂盒

英文名:Skygen SYBR Real-Time Error-Prone PCR Kit
产品编号:230712
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
货号 规格 货期 目录价
230712 100 T 现货

产品内容

    易错PCR(Error-Prone PCR)是利用天然Taq DNA聚合酶不具有3′→5′校对功能的特性,在一定条件下能够按较高的机率随机引入突变而设计。如果有适当的突变选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体,用于人工诱变。但是易错PCR在操作中最大的问题是最佳PCR循环数的摸索,循环次数太多或太少,都得不到成形的突变DNA条带,影响后续的DNA回收和克隆步骤。为克服此缺点,本公司开发了染料法实时易错PCR产品,它具有下列特点:

1.     即开即用,十分简单方便。

2.     可以实时监控PCR的进程,用户可以不需要任何摸索就能在最佳时间(荧光信号刚进入平台期)停止PCR,立即进行电泳,回收到突变DNA。

3.     配方经过精心优化,突变率稳定,用本试剂盒进行一次标准的易错PCR扩增实验一般会得到6-7个突变(对1000 bp的片段而言)。进行定向突变时每个基因有2-6个突变为最佳范围。

4.     比体内基因突变更快捷简单,但如果在PCR引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。

5.     可用于连续易错PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。

6.     只适用于扩增1 kb以下的产物,对于1 kb以上的产物,建议分段扩增。

7.     本产品足够100次30 mL体系的染料法实时易错PCR反应。

      8.     本产品只能用于科研。

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常见问题

Q1: 天净沙染料法实时易错PCR试剂盒适合用在哪些实验里?
A1: 天净沙染料法实时易错PCR试剂盒专用于分子生物学试剂相关的检测研究,适用于检疫、监测、科研等非临床领域。产品说明书中明确标注“本产品只能用于科研”,因此不能用于临床诊断或作为医疗决策依据。

Q2: 天净沙染料法实时易错PCR试剂盒收到后怎么存放?
A2: 为确保试剂活性,天净沙染料法实时易错PCR试剂盒需低温运输、-20℃保存。收到货后请立即置于 -20℃ 冰箱,有效期通常为 24 个月。引物探针干粉使用前短暂离心、加超纯水配成混合液,未用完部分同样 -20℃保存。

Q3: 天净沙染料法实时易错PCR试剂盒中的阳性对照是什么?是否具有传染性?
A3: 为保障安全、避免病原扩散,天净沙染料法实时易错PCR试剂盒不提供活病原或具传染性的核酸作为阳性对照,通常提供无传染性的对照片段,用于建立标准曲线、验证实验有效性及区分假阴性。如需活样请另行订购。

Q4: 实验操作中如何设置对照才能确保结果有效?
A4: 请严格按说明书设置标准曲线样品(定量必需)、阴性对照(以水为模板监测污染)以及样品制备阴/阳性对照,以监控核酸提取与扩增全过程的有效性,确保每次检测结果可靠。

Q5: 如何根据 Ct 值判断天净沙染料法实时易错PCR试剂盒的检测结果?
A5: 判读需结合扩增曲线与 Ct 值:检测样品 Ct 值达到阈值且曲线呈典型 S 型为阳性;处于可疑区间须重复实验确认;无有效扩增曲线为阴性。具体阈值与复测规则以说明书为准。