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本酶催化的反应为(1) Calcitriol + NADPH + H+ + O2 = Calcitetrol + NADP+ + H2O;;(2) Calcidiol + NADPH + H+ + O2 = Secalciferol + NADP+ + H2O，系统名称为Calcitriol,NADPH:oxygen Oxidoreductase (24-Hydroxylating)，一种血红素-硫醇盐酶（P-450）。第二供体 NADPH 通过 EC 1.18.1.2（铁氧还蛋白---NADP+ 还原酶）和一个 [2Fe-2S] 铁氧还蛋白提供电子。该酶可对底物骨化三醇进行多达 6 轮羟基化，最终生成 calcitroic acid。人源酶还显示 23-羟化活性，终产物为 1,25-二羟基维生素 D3-26,23-内酯，而小鼠和大鼠酶则没有。
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