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本酶催化的反应为Calciol + O2 + [Reduced NADPH---Hemoprotein Reductase] = Calcidiol + [Oxidized NADPH---Hemoprotein Reductase] + H2O，系统名称为Calciol,NADPH---Hemoprotein Reductase:oxygen Oxidoreductase (25-Hydroxylating)，一种从人肝和小鼠肝中分离的微粒体酶，使维生素D3生物活化。虽然多种同工酶（CYP27A1、CYP2J2/3、CYP3A4、CYP2D25和CYP2C11）都能在体外催化该反应，但认为在人体内只有CYP2R1催化该反应 [4]。该酶的直接电子供体是 EC 1.6.2.4，NADPH---血红蛋白还原酶。
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