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本酶催化的反应为(1) Calcitriol + 2 Reduced Adrenodoxin + 2 H+ + O2 = Calcitetrol + 2 Oxidized Adrenodoxin + H2O;;(2) Calcidiol + 2 Reduced Adrenodoxin + 2 H+ + O2 = Secalciferol + 2 Oxidized Adrenodoxin + H2O，系统名称为Calcitriol,adrenodoxin:oxygen Oxidoreductase (24-Hydroxylating)，这种线粒体细胞色素P-450酶需要肾上腺皮质铁氧还蛋白。该酶可对底物骨化三醇进行最多6轮羟化，生成calcitroic acid。人该酶还显示23-羟化活性，生成终产物1,25-二羟基维生素D3-26,23-内酯，而小鼠和大鼠的酶则无此活性。电子最初来源于NADPH，后者经 EC 1.18.1.6，肾上腺皮质铁氧还蛋白-NADP+还原酶将电子转移给肾上腺皮质铁氧还蛋白。
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