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本酶催化的反应为Ferroheme O + H2O + 2 Acceptor = Ferroheme A + 2 Reduced Acceptor (Overall Reaction);;(1a) Ferroheme O + H2O + Acceptor = Ferroheme I + Reduced Acceptor;;(1b) Ferroheme I + H2O + Acceptor = Hydroxyferroheme I + Reduced Acceptor;;(1c) Hydroxyferroheme I = Ferroheme A + H2O (Spontaneous),系统名称为Ferroheme O:acceptor C-81-Oxidoreductase (Heme A-Forming),含有血红素 b 辅因子。该酶催化血红素 o 转化为血红素 a,以水作为氧源对 C-8 位甲基进行两次连续羟化。第一次羟化形成血红素 i,第二次羟化产生不稳定的二羟甲基基团,该基团自发脱水,形成血红素 a 的甲酰基 [2,4]。反应产生的电子被转移至血红素 b 辅因子 [6]。然而,用于将血红素 b 辅因子恢复至氧化态的电子受体仍不清楚(硫氧还蛋白样蛋白和甲萘醌醇均被提出)。