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本酶催化的反应为Dethiobiotin + Sulfur-(Sulfur Carrier) + 2 S-Adenosyl-L-Methionine + 2 Reduced [2Fe-2S] Ferredoxin = Biotin + (Sulfur Carrier) + 2 L-Methionine + 2 5'-Deoxyadenosine + 2 Oxidized [2Fe-2S] Ferredoxin，系统名称为Dethiobiotin:sulfur-(Sulfur Carrier) Sulfurtransferase，该酶结合一个 [4Fe-4S] 和一个 [2Fe-2S] 簇。在每个反应循环中，该酶消耗两分子 AdoMet。第一个反应产生 5'-脱氧腺苷和 4,5-开环生物素（4,5-secobiotin）。与另一当量 AdoMet 反应导致从 4,5-开环生物素中夺取 C-6 亚甲基的 pro-S 氢原子，产生的碳自由基通过形成分子内 C-S 键而被淬灭，从而闭合生物素的四氢噻吩环。硫供体被认为是 [2Fe-2S] 簇，该簇在此过程中被牺牲，因此体外反应为单周转。在体内，[2Fe-2S] 簇可由 Isc 或 Suf 铁硫簇组装系统重新组装，以允许进一步的催化。
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