本酶催化的反应为Dipeptidase E Catalyses The Hydrolysis Of Dipeptides Asp!Xaa. It Does Not Act On Peptides With N-Terminal Glu, Asn Or Gln, Nor Does It Cleave Isoaspartyl Peptides，底物中不绝对需要游离羧基，因为Asp-Phe-NH2和Asp-Phe-OMe的水解速度比具有游离C-端的二肽稍慢。已知没有比C-端封闭的二肽更大的肽作为底物。Asp-NH-Np可被水解，是常规测定的方便底物。该酶在pH 7.0附近活性最高，不受二异丙基氟磷酸或苯甲磺酰氟抑制。属于肽酶家族S51。
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