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本酶催化的反应为5-Amino-1-(5-Phospho-D-Ribosyl)imidazole + S-Adenosyl-L-Methionine =
4-Amino-2-Methyl-5-(Phosphooxymethyl)pyrimidine + 5'-Deoxyadenosine + L-Methionine + Formate + CO，系统名称为5-Amino-1-(5-Phospho-D-Ribosyl)imidazole Formate-Lyase (Decarboxylating, 4-Amino-2-Methyl-5-(Phosphooxymethyl)pyrimidine-Forming)，结合一个由 3 个半胱氨酸和一个可交换的 S-腺苷-L-甲硫氨酸分子配位的 [4Fe-4S] 簇。催化第一阶段是还原 S-腺苷-L-甲硫氨酸，生成 L-甲硫氨酸和对底物转化至关重要的 5'-脱氧腺苷-5'-基自由基。参与硫胺素生物合成途径的一部分。
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