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本酶催化的反应为(1R,2S)-1-Hydroxybutane-1,2,4-Tricarboxylate = (Z)-But-1-Ene-1,2,4-Tricarboxylate + H2O，系统名称为(1R,2S)-1-Hydroxybutane-1,2,4-Tricarboxylate Hydro-Lyase [(Z)-But-1-Ene-1,2,4-Tricarboxylate-Forming]，活性需要[4Fe-4S]簇。来自超嗜热真细菌嗜热栖热菌（Thermus thermophilus）的酶可以催化上述反应，但不能催化先前描述的反应，即通过顺式-高乌头酸水合形成(R)-高柠檬酸。在 T. thermophilus 中负责将顺式-高乌头酸转化为(R)-高柠檬酸的酶目前未知，但该反应可以在体外使用猪的乌头酸水合酶（EC 4.2.1.3）催化 [2]。
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