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本酶催化的反应为(2S,3S)-2-Hydroxybutane-1,2,3-Tricarboxylate = (Z)-But-2-Ene-1,2,3-Tricarboxylate + H2O，系统名称为(2S,3S)-2-Hydroxybutane-1,2,3-Tricarboxylate Hydro-Lyase [(Z)-But-2-Ene-1,2,3-Tricarboxylate-Forming]，该酶对(2S,3S)-甲基柠檬酸特异，对(2R,3S)-甲基柠檬酸无活性 [2]。该酶也可以使用顺式乌头酸作为底物，但速度较慢 [2]。该酶和EC 4.2.1.3 乌头酸水合酶都需要来完成(2S,3S)-甲基柠檬酸向(2R,3S)-2-甲基异柠檬酸的异构化 [2]。
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