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本酶催化的反应为ATP + D-Alanine + Holo-[D-Alanyl-Carrier Protein] = AMP + Diphosphate + D-Alanyl-[D-Alanyl-Carrier Protein] (Overall Reaction);;(1a) ATP + D-Alanine = (D-Alanyl)adenylate + Diphosphate;;(1b) (D-Alanyl)adenylate + Holo-[D-Alanyl-Carrier Protein] = AMP + D-Alanyl-[D-Alanyl-Carrier Protein]，系统名称为D-Alanine:[D-Alanyl-Carrier Protein] Ligase，该酶参与壁磷壁酸以及 I 型和 IV 型脂磷壁酸被 D-丙氨酸残基的修饰。它利用 ATP 活化 D-丙氨酸，形成高能 (D-丙氨酰)腺苷酸中间体，随后将丙氨酰部分转移到 D-丙氨酰载体蛋白（DltC）共价结合的磷酸泛酰巯基乙胺辅因子上。
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