天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL产品图片
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天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL

英文名:Skygen KOD DNA Polymerase 5 U/μL
别名:P77933
产品编号:901002
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
货号 规格 货期 目录价
901002 250 U In Stock

产品内容

      KOD DNA聚合酶是经基因工程的方法改造而获得的一种具备扩增效率高、保真性强等特点的高保真DNA聚合酶,适用于各种PCR反应中。对于扩增复杂模板亦能达到最优的效果,可有效从gDNA、cDNA等样品中直接捕获目的片段,该酶对PCR抑制剂具有一定的耐受性。同时,配合经优化的buffer成分一起使用,可以对高GC序列、发夹结构、重复序列等困难结构进行有效扩增。它具有下列特点:

1.高保真:保真度为常规Taq酶的52倍,Pfu的6倍,可有效降低PCR扩增过程中引起的突变。

2.高效率:相比与其他商业化酶,扩增效率可高达15-30 s/kb。

3.灵敏:可从0.05 ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。

4.耐受性高:对PCR抑制剂具有一定耐受性,可直接从细菌、血液、细胞等样品中直接捕获目的片段。

       5.应用范围广:优化的缓冲体系广泛适用于各种结构的模板扩增,如高GC序列、发夹结构等。

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常见问题

Q1: 一个单位(天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL)代表多少酶量?
A1: 天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL的一个酶活性单位(U)指在推荐缓冲液与温度(通常 37℃)下,1 小时内完全消化 1 μg 底物 DNA 中特定识别位点所需的酶量。可据此结合待消化底物的预估位点数量估算实验用量。

Q2: 天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL反应要用什么缓冲液?
A2: 天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL在厂家提供的专用缓冲液中具有最佳活性,标准单酶切反应条件为 37℃ 温育 1 小时。请严格遵循说明书建议的缓冲体系与温度时间,避免可能的星号活性。该酶与多数常见分子试剂兼容。

Q3: 酶切反应完成后是否需要热失活?
A3: 天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL通常可通过 65℃ 加热 20 分钟实现热失活,便于后续连接、转化等下游实验。具体条件以说明书为准;若下游对酶残留敏感,也可采用纯化柱回收 DNA 片段。

Q4: 什么是“星号活性”?如何避免?
A4: 星号活性指酶在非最优条件(甘油过高、离子强度不适、pH 偏差或酶过量)下切割非典型序列的现象。请控制反应体系甘油浓度不超过 5%、使用推荐缓冲液、避免过量加酶、在准确温度下反应。

Q5: 天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL平时怎么存放?
A5: 天净沙KOD DNA聚合酶 5 U/μL应于 -20℃ 冷冻保存与运输,酶液通常含 50% 甘油缓冲液以防冻结。日常请冰上操作、用后立即放回 -20℃,以维持其长期稳定性与活性。