Folin酚(福林酚)试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚氨基酸(色氨酸和酪氨酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物,此复合物再使Folin酚试剂还原,发生显色反应,产物在500 nm-750 nm之间均可检测。Lowry法可以同时检测含芳香环基团氨基酸和肽键,故灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右,是双缩脲反应的200倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。Lowry法检测原理图如下:

Lowry法检测是基于还原反应,故极易受还原剂(DTT、巯基乙醇、半胱氨酸和谷胱甘肽等)、糖(果糖、蔗糖等)、含芳香环基团的氨基酸(酪氨酸和色氨酸)、甘油、钾离子、尿素、硫酸铵(铵离子具有还原性)、EDTA这些常见试剂的干扰,为此本公司对Lowry法进行改良,具有下列特点:
1. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2. 可以直接测定水溶性细胞成份和非水溶性细胞成份(如细胞膜系制备物,细胞膜蛋白,脂蛋白,酸沉淀物,冻干粉等)的蛋白含量。
3. 能抵抗部分干扰物(如0.1 M蔗糖、2.5 mM EDTA、4 M尿素和1%去污剂)的干扰。如需进一步去除还原剂等其他干扰物质,需要按附录方法处理。
4. 检测线性范围广,在2-100 g,检测上限比经典Lowry法高30%-40%。
5. 本试剂盒足够100次1 mL体系的比色皿测定或400次0.25 mL的微孔板测定。
6. 本产品只能用于科研。