天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)产品图片
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天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)

英文名:Skygen Single Cell cDNA Amplification Kit (T7 in vitro Transcription, double-stranded cDNA)
产品编号:220732-2
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
货号 规格 货期 目录价
220732-2 200 T 1-2 Weeks

产品内容

    单细胞是非常重要的实验材料,但是由于单细胞中的RNA很少,平均只有约10 pg总RNA,0.1 pg mRNA。但拷贝算,一个小鼠胚胎干细胞只有2万多个mRNA分子,一个小鼠成纤维细胞只有50万个mRNA分子。因此常常需要将其逆转录成cDNA后,对cDNA进行扩增,方便后续使用。扩增的方法主要有PCR和体外转录法。本产品是基于T7 体外转录法开发的cDNA扩增试剂盒,它具有下列特点:
1.    一站式,即开即用,用户不用单独购买原料并进行优化。
2.    直接用1-500个真核细胞为起始材料,最后得到cDNA单链。本产品不适用于mRNA没有polyA尾巴的细胞,但可以定做本产品的改良型。
3.    基于T7 IVT线性扩增而非PCR扩增,避免了PCR扩增的偏向性。
4.    单链和双链cDNA合成一管完成,减少了多步操作。
5.    可以进行1次或多次扩增,每次扩增可以将拷贝数提升上万倍。
6.    基于磁珠法合成,可以反复使用至少5次,极大提高了效率。
7.    所得cDNA单链可以用于后续实验。如果加入自备的标记核苷酸,还可以进行单细胞cDNA标记,用于后续芯片杂交。
8.    提供可以spike in的阳性对照,方便检测各步效果。
9.    本产品足够进行200次10 mL体系单细胞逆转录反应和10 μL体系的cDNA扩增。本产品不含单细胞制备试剂盒。
10.    本产品只能用于科研。

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常见问题

Q1: 天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)适合用在哪些实验里?
A1: 天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)专用于分子生物学试剂相关的检测研究,适用于检疫、监测、科研等非临床领域。产品说明书中明确标注“本产品只能用于科研”,因此不能用于临床诊断或作为医疗决策依据。

Q2: 天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)收到后怎么存放?
A2: 为确保试剂活性,天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)需低温运输、-20℃保存。收到货后请立即置于 -20℃ 冰箱,有效期通常为 24 个月。引物探针干粉使用前短暂离心、加超纯水配成混合液,未用完部分同样 -20℃保存。

Q3: 天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)中的阳性对照是什么?是否具有传染性?
A3: 为保障安全、避免病原扩散,天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)不提供活病原或具传染性的核酸作为阳性对照,通常提供无传染性的对照片段,用于建立标准曲线、验证实验有效性及区分假阴性。如需活样请另行订购。

Q4: 做天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)实验必须设哪些对照?
A4: 请严格按说明书设置标准曲线样品(定量必需)、阴性对照(以水为模板监测污染)以及样品制备阴/阳性对照,以监控核酸提取与扩增全过程的有效性,确保每次检测结果可靠。

Q5: 天净沙单细胞cDNA扩增试剂盒(T7体外转录法,双链cDNA产物)的结果怎么判读?
A5: 判读需结合扩增曲线与 Ct 值:检测样品 Ct 值达到阈值且曲线呈典型 S 型为阳性;处于可疑区间须重复实验确认;无有效扩增曲线为阴性。具体阈值与复测规则以说明书为准。