逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)产品图片
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逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)

英文名:Reverse Transcriptase Assay
别名:产品别名
产品编号:221044
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
货号 规格 货期 目录价
221044 50 T 现货

产品内容

    WHO规定生物制品中不能含有逆转录病毒污染,逆转录病毒种类繁多,故一般通过检测逆转录酶活性来间接检测逆转录病毒存在与否。药典规定的检测逆转录酶的方法是PERT法(Product-Enhanced Reverse Transcription),其原理是用待测样品代替逆转录酶进行RT-PCR,通过标准品制备的标准曲线计算出样品中是否存在逆转录酶以及其浓度,进而推算出样本是否含有逆转录病毒及其浓度。PERT法根据酶活性检测,普适性广,可检测出oncovirus、lentivirus和spumavirus等几大类已知和未知的逆转录病毒。但常规PERT法是两步法RT-PCR加电泳检测,操作繁琐,误差大,不适合高通量操作。为克服此缺点,本公司开发了一管式实时PERT试剂盒。它具有下列特点:
1.    即开即用,用户只需提供待测样品,一步加样操作,变异系数小,适合高通量操作。
2.    实时荧光检测,一管式反应,避免样本交差污染。
3.    灵敏性高,最低可以检测到几十个逆转录酶分子的活性。
4.    可用于测定Bst,RTx逆转录活性,但不适用于Tth逆转录活性测定。
5.    背景低,本产品所用的DNA聚合酶不含背景逆转录酶活性,使用的RNA模板在生命周期中无DNA环节,不会自带污染源。
6.    起始样本可以是细胞培养上清液、细胞裂解液和纯化的逆转录酶溶液,可以检测到里面所含有的逆转录酶活性,并由此判断是否有逆转录病毒的存在。
7.    含逆转录酶阳性对照,便于制备标准曲线和排除假阴性实验。
8.    定量检测的线性范围至少为6个数量级。
9.    本产品足够50次20 μL体系的PERT反应。
10.    本产品只能用于科研,包括生物制品和细胞库等质检环节。

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常见问题

Q1: 逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)适合用在哪些实验里?
A1: 逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)专用于引物探针基因克隆假病毒相关的检测研究,适用于检疫、监测、科研等非临床领域。产品说明书中明确标注“本产品只能用于科研”,因此不能用于临床诊断或作为医疗决策依据。

Q2: 逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)的运输和储存条件有什么特别要求?
A2: 为确保试剂活性,逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)需低温运输、-20℃保存。收到货后请立即置于 -20℃ 冰箱,有效期通常为 24 个月。引物探针干粉使用前短暂离心、加超纯水配成混合液,未用完部分同样 -20℃保存。

Q3: 试剂盒的对照安全吗?
A3: 为保障安全、避免病原扩散,逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)不提供活病原或具传染性的核酸作为阳性对照,通常提供无传染性的对照片段,用于建立标准曲线、验证实验有效性及区分假阴性。如需活样请另行订购。

Q4: 做逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)实验必须设哪些对照?
A4: 请严格按说明书设置标准曲线样品(定量必需)、阴性对照(以水为模板监测污染)以及样品制备阴/阳性对照,以监控核酸提取与扩增全过程的有效性,确保每次检测结果可靠。

Q5: 逆转录酶活性检测试剂盒(一步式PERT法)的结果怎么判读?
A5: 判读需结合扩增曲线与 Ct 值:检测样品 Ct 值达到阈值且曲线呈典型 S 型为阳性;处于可疑区间须重复实验确认;无有效扩增曲线为阴性。具体阈值与复测规则以说明书为准。