天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)产品图片
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天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)

英文名:Skygen Circular RACE Kit (PCR Method)
产品编号:221071
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221071 10 T 询货

产品内容

    确定基因的转录起始位点和终止位点是研究基因结构和功能的最重要工作之一,最通用的方法是Frohman发明Rapid Amplification of cDNA Ends。其用于确定转录起始位点的方法叫5′ RACE法,用于确定转录终点的方法叫3′ RACE法。它们是通过PCR快速克隆cDNA末端,在不建立cDNA文库的前提下,利用已知cDNA序列设计引物,通过向mRNA两端延伸和扩增获得两个末端的序列。但是要确定RNA两端的序列需要做两次RACE,为克服此缺点,本公司开发了环状RACE试剂盒,其原理如下:
 
    本产品具有下列特点:
1.    即开即用,客户只需要准备总RNA(或mRNA)和专一性引物,不需要单独准备其他试剂。
2.    一次实验可以同时获得mRNA两端的序列。
3.    通过适配子进行cDNA自连,不但效率高,而且测序时知晓哪里是自连位点。
4.    本产品足够10次环状RACE实验(10次双链cDNA合成反应,20次环化反应,100次PCR反应)。
5.    起始材料为纯化后的mRNA,用户需要准备两套PCR引物。
6.    本产品只能用于科研。

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常见问题

Q1: 天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)的主要应用场景是什么?能否用于临床诊断?
A1: 天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)专用于分子生物学试剂相关的检测研究,适用于检疫、监测、科研等非临床领域。产品说明书中明确标注“本产品只能用于科研”,因此不能用于临床诊断或作为医疗决策依据。

Q2: 天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)的运输和储存条件有什么特别要求?
A2: 为确保试剂活性,天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)需低温运输、-20℃保存。收到货后请立即置于 -20℃ 冰箱,有效期通常为 24 个月。引物探针干粉使用前短暂离心、加超纯水配成混合液,未用完部分同样 -20℃保存。

Q3: 天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)中的阳性对照是什么?是否具有传染性?
A3: 为保障安全、避免病原扩散,天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)不提供活病原或具传染性的核酸作为阳性对照,通常提供无传染性的对照片段,用于建立标准曲线、验证实验有效性及区分假阴性。如需活样请另行订购。

Q4: 实验操作中如何设置对照才能确保结果有效?
A4: 请严格按说明书设置标准曲线样品(定量必需)、阴性对照(以水为模板监测污染)以及样品制备阴/阳性对照,以监控核酸提取与扩增全过程的有效性,确保每次检测结果可靠。

Q5: 如何根据 Ct 值判断天净沙环状RACE试剂盒(PCR法)的检测结果?
A5: 判读需结合扩增曲线与 Ct 值:检测样品 Ct 值达到阈值且曲线呈典型 S 型为阳性;处于可疑区间须重复实验确认;无有效扩增曲线为阴性。具体阈值与复测规则以说明书为准。