SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)产品图片
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SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)

英文名:SD3.0 DNA Polymerase (Strand Displacement Activity, 5'-3' And 3'-5' Exonuclease Deficient)
产品编号:230199
保存温度:-20℃
运输温度:Cold
货号 规格 货期 目录价
230199 250 U 现货

产品内容

    本产品是SD3.0 DNA聚合酶是一种具有强链置换活性的新型耐热DNA聚合酶。该酶具有Phi29和Bst DNA聚合酶的链置换活性和持续合成能力,并可耐受95℃的高温。这些特性使得该酶成为PCDR(Polymerase Chain Displacement Reaction)的最佳用酶。此外,该酶可用于LAMP、tHDA、RCA以及NGS文库的构建。它具有如下特点:
1.    该酶具有5'-3'的聚合酶活性、5'-3'的链置换活性、该酶无5'-3'的外切酶活性,扩增速度为1 kb/min,在72℃具有最佳活性。
2.    SD3.0 DNA聚合酶的储存Buffer为:10 mM Tris-HCl,pH 8.0,150 mM NaCl,2 mM DTT,50% Glycerol。
3.    本产品足够125次50 μL体系的PCDR反应,250次25 μL体系的LAMP反应。
4.    本产品只可用于科研。

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常见问题

Q1: SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)的活性单位是如何定义的?
A1: SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)的一个酶活性单位(U)指在推荐缓冲液与温度(通常 37℃)下,1 小时内完全消化 1 μg 底物 DNA 中特定识别位点所需的酶量。可据此结合待消化底物的预估位点数量估算实验用量。

Q2: SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)反应要用什么缓冲液?
A2: SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)在厂家提供的专用缓冲液中具有最佳活性,标准单酶切反应条件为 37℃ 温育 1 小时。请严格遵循说明书建议的缓冲体系与温度时间,避免可能的星号活性。该酶与多数常见分子试剂兼容。

Q3: 酶切反应完成后是否需要热失活?
A3: SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)通常可通过 65℃ 加热 20 分钟实现热失活,便于后续连接、转化等下游实验。具体条件以说明书为准;若下游对酶残留敏感,也可采用纯化柱回收 DNA 片段。

Q4: 什么是“星号活性”?如何避免?
A4: 星号活性指酶在非最优条件(甘油过高、离子强度不适、pH 偏差或酶过量)下切割非典型序列的现象。请控制反应体系甘油浓度不超过 5%、使用推荐缓冲液、避免过量加酶、在准确温度下反应。

Q5: SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)平时怎么存放?
A5: SD3.0 DNA聚合酶(有链取代活性,5-3、3-5exo-)应于 -20℃ 冷冻保存与运输,酶液通常含 50% 甘油缓冲液以防冻结。日常请冰上操作、用后立即放回 -20℃,以维持其长期稳定性与活性。