钙黄绿素(Calcein)的CAS号为1461-15-0,其分子结构式如下:

钙黄绿素可用作LAMP可见光染料,其原理是在有Mn离子存在的LAMP扩增体系,如果没有LAMP核酸扩增发生,Mn离子和钙黄绿素结合,在紫外照射时不发荧光。如果有LAMP核酸扩增发生,则DNA合成时将产生大量焦磷酸,这些焦磷酸将优先跟Mn2+结合,钙黄绿素则跟体系中多余的Mg2+结合,在紫外照射时将发荧光。标准LAMP反应中的镁离子浓度通常在4-10mM之间(跟引物浓度,dNTP浓度相关)。其原理图如下:

本产品就是专门用于LAMP扩增的钙黄绿素染料,为20×,它具有下列特点:
1. 即开即用,可以直接加入到含Mn的LAMP扩增体系中。
2. 其最佳用量根据LAMP体系不同需要用户自己优化,但一般需要终浓度为0.5 mM的Mn离子,Mg离子终浓度跟标准LAMP反应的Mg离子浓度一样。
3. 本产品足够1000次左右的20 μL体系的LAMP反应。
4. 本产品只能用于科研。