本产品是基于填充法(Fill-in)的双链DNA 3端标记试剂盒,其原理是Klenow DNA聚合酶以5端突出的DNA为模板,在修补DNA 3端的时候掺入标记了生物素的核苷酸到新合成的DNA中,从而得到生物素标记DNA探针。其原理示意图如下:

本产品具有下列特点:
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分,简化了反应加样步骤,提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解,探针产量更高。
3. 快速,最快25分钟即可完成标记反应。
4. 效率几乎可达到100%。
5. 每次标记反应至少需要100 ng(0.1 mg)模板DNA。模板DNA必须是线状的、5端突出的双链DNA,不能是平末端或3端突出的双链DNA。
6. 无扩增反应,标记产物获得量与投入量一致。
7. 掺入标记核苷酸的数量精准,适用于某些特殊的实验。但得到的探针比活不如随机引物法或PCR法制备的探针,因为掺入的标记核苷酸少。
8. 本产品足够30次20mL体系的填入法标记实验。
9. 本产品只能用于科研。