重组酶介导链置换核酸扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA/RAA),是一种恒温核酸快速扩增技术。通用探针法RT-RPA试剂盒(逆转录重组酶聚合酶扩增)将反转录和扩增过程同步进行,在等温条件下(一般为39℃),反应10~30分钟,以样本RNA为模板即可实现对目的基因片段的扩增。本产品具有下列特点:
1. 本试剂盒可用于一步法实现RNA扩增,并通过荧光探针法对扩增的RNA进行检测。
2. 要求引物设计长度30~35 bp,扩增片段80~500 bp,探针长度46~52 bp,并在中部THF位点两侧标记荧光基团及淬灭基团,探针5’端到THF位点至少要30个碱基;THF位点到3’端至少要15个碱基,3’端修饰阻断基团,以保证扩增反应的快速灵敏有效。
3. 本试剂盒在39℃条件下,10拷贝/测试的质粒可以得到稳定扩增;具体的灵敏度与该项目的引物探针设计有关。
4. 本试剂盒中由阳性质控品以及配套的阳性对照正向引物、阳性对照反向引物和阳性对照探针组成的扩增体系主要用来评估试剂盒中的试剂是否有效。
5. 试剂盒采用泡沫箱加蓄冷剂的方式运输7天,温度不高于20℃不会影响产品性能。
6. 本产品只能用于科研。