本产品是苯酚-氯仿-异戊醇(Phenol-Chloroform-Isoamyl Alcohol,PCI)的25:24:1的混合液,pH偏酸性,用于RNA提取时去除蛋白质、多糖、脂类和酚类等杂质。本产品不能用于DNA提取。
RNA纯化时苯酚的作用是使裂解液中的蛋白质变性,同时抑制RNase对RNA的降解作用。用苯酚处理裂解液时,由于蛋白分子表面的很多极性基团与苯酚相似相溶,故蛋白分子溶于酚相,而RNA溶于水相,从而将RNA和蛋白质分开。氯仿的作用是让水和酚彻底分开,不互溶,彻底去除水相中的残留苯酚,从水溶液中沉淀得到的RNA就没有酚污染。异戊醇的作用是降低表面张力,从而减少操作过程(常常有震荡步骤)中气泡的产生,而这些气泡的表面张力可能会使RNA断裂。另外,异戊醇还有助于水相和酚相分相,使离心后的上层水相(含RNA)、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定,便于移取上清。