MNase反应液产品图片
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MNase反应液

英文名:MNase Reaction Buffer
产品编号:6-2066
保存温度:4-25℃
运输温度:4-25℃
货号 规格 货期 目录价
6-2066 250 mL 现货

产品内容

    本产品是MNase反应液,是微球菌核酸酶(MNase)的专用反应缓冲液。产品配方为:10 mM, pH 8.0 HEPES;50 mM氯化钾;5 mM氯化镁;3 mM氯化钙;1 mM DTT;0.1% NP-40;8% 甘油。本产品只能用于科研。

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常见问题

Q1: MNase反应液的活性单位是如何定义的?
A1: MNase反应液的一个酶活性单位(U)指在推荐缓冲液与温度(通常 37℃)下,1 小时内完全消化 1 μg 底物 DNA 中特定识别位点所需的酶量。可据此结合待消化底物的预估位点数量估算实验用量。

Q2: MNase反应液的最佳反应条件是什么?需要使用特定缓冲液吗?
A2: MNase反应液在厂家提供的专用缓冲液中具有最佳活性,标准单酶切反应条件为 37℃ 温育 1 小时。请严格遵循说明书建议的缓冲体系与温度时间,避免可能的星号活性。该酶与多数常见分子试剂兼容。

Q3: 酶切反应完成后是否需要热失活?
A3: MNase反应液通常可通过 65℃ 加热 20 分钟实现热失活,便于后续连接、转化等下游实验。具体条件以说明书为准;若下游对酶残留敏感,也可采用纯化柱回收 DNA 片段。

Q4: 什么是“星号活性”?如何避免?
A4: 星号活性指酶在非最优条件(甘油过高、离子强度不适、pH 偏差或酶过量)下切割非典型序列的现象。请控制反应体系甘油浓度不超过 5%、使用推荐缓冲液、避免过量加酶、在准确温度下反应。

Q5: MNase反应液如何运输和保存?
A5: MNase反应液应于 -20℃ 冷冻保存与运输,酶液通常含 50% 甘油缓冲液以防冻结。日常请冰上操作、用后立即放回 -20℃,以维持其长期稳定性与活性。